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　　二氧化氯作為高效廣譜消毒劑，對(duì)甲型流感病毒、新冠病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等多種病毒均有滅活作用。但病毒結(jié)構(gòu)特殊，其殺滅效果需通過(guò)精準(zhǔn)的試驗(yàn)指標(biāo)與規(guī)范方法驗(yàn)證。二氧化氯消毒劑病毒殺滅試驗(yàn)有哪些方法？

　　二氧化氯消毒劑病毒殺滅試驗(yàn)指標(biāo)

　　殺滅率（KillingRate）：最核心的效能指標(biāo)，指消毒后病毒數(shù)量較消毒前減少的百分比。根據(jù)消毒等級(jí)要求，分為普通消毒（殺滅率≥99.9%）、高效消毒（殺滅率≥99.99%）、滅菌級(jí)消毒（殺滅率≥99.999%）。針對(duì)高致病性病毒（如新冠病毒），公共環(huán)境消毒需達(dá)到≥99.99%，醫(yī)療器械消毒需≥99.999%。

　　半數(shù)致死量下降值（Log??reductionofLD??）：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定，指消毒后病毒半數(shù)致死量（LD??）較原病毒的對(duì)數(shù)下降值，通常要求≥3Log??（即病毒感染力下降1000倍以上）。

　　病毒滴度下降值：以TCID??（50%組織培養(yǎng)感染劑量）為單位，衡量消毒前后病毒感染能力的變化，合格標(biāo)準(zhǔn)需滿足滴度下降≥4Log??（適用于醫(yī)療場(chǎng)景）或≥3Log??（適用于環(huán)境場(chǎng)景）。

　　二氧化氯消毒劑病毒殺滅試驗(yàn)方法

　　1、懸液定量殺滅試驗(yàn)：評(píng)估消毒劑對(duì)游離病毒的殺滅能力

　　適用于液體消毒劑（如二氧化氯溶液）對(duì)懸浮態(tài)病毒的滅活效果檢測(cè)，核心驗(yàn)證消毒劑與病毒直接接觸的作用效能。

　　（1）試驗(yàn)操作

　　混合反應(yīng)：取9ml不同濃度的二氧化氯消毒劑溶液于無(wú)菌試管中，置于設(shè)定溫度（如20℃）的水浴鍋中預(yù)熱5分鐘，加入1ml病毒懸液，迅速搖勻，開(kāi)始計(jì)時(shí)。

　　中和終止：到達(dá)設(shè)定作用時(shí)間（如1min、5min）后，立即取0.5ml混合液加入4.5ml中和劑中，搖勻后放置10分鐘，終止消毒作用。

　　病毒滴定：將中和后的樣品做10倍梯度稀釋?zhuān)?0?1至10??），取各稀釋度0.1ml分別接種至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（每孔已接種單層敏感細(xì)胞），每個(gè)稀釋度做8個(gè)復(fù)孔。

　　培養(yǎng)觀察：將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病變（CPE），連續(xù)觀察7天，記錄出現(xiàn)CPE的孔數(shù)。

　　（2）結(jié)果計(jì)算與判定

　　按Reed-Muench法計(jì)算消毒前后病毒的TCID??/ml，殺滅對(duì)數(shù)值=lg（消毒前病毒滴度）-lg（消毒后病毒滴度）。

　　若殺滅對(duì)數(shù)值≥4.0（醫(yī)療場(chǎng)景）或≥3.0（環(huán)境場(chǎng)景），且陰性對(duì)照組（無(wú)消毒劑）病毒滴度正常、中和劑對(duì)照組無(wú)菌落生長(zhǎng)，則判定該濃度和作用時(shí)間下殺滅效果合格。

　　2、載體定量殺滅試驗(yàn)：模擬實(shí)際場(chǎng)景中附著態(tài)病毒的殺滅效果

　　適用于物體表面、醫(yī)療器械等場(chǎng)景，病毒附著于載體表面，更貼近實(shí)際消毒條件，常用載體為不銹鋼片、玻璃片、脫脂棉片。

　　（1）試驗(yàn)操作

　　消毒處理：將染菌載體完全浸泡于二氧化氯消毒劑中（或用消毒劑均勻擦拭載體表面），置于設(shè)定溫度下，開(kāi)始計(jì)時(shí)。

　　洗脫中和：到達(dá)作用時(shí)間后，立即將載體移入含10ml中和劑的無(wú)菌三角瓶中，振蕩5分鐘（不銹鋼/玻璃片）或擠壓浸泡10分鐘（脫脂棉片），充分洗脫病毒并中和消毒劑。

　　后續(xù)滴定：取洗脫液按懸液定量法進(jìn)行病毒滴定與培養(yǎng)觀察，同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組（載體未消毒）、陰性對(duì)照組（載體無(wú)病毒）。

　　（2）結(jié)果判定

　　計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值，要求≥3.0（環(huán)境表面）或≥4.0（醫(yī)療器械），且對(duì)照組結(jié)果符合要求，則判定合格。